無菌檢測潔凈室浮游菌檢驗及常見問題

建立無菌室浮游菌檢測限度操作流程，標準無菌室浮游菌的檢驗。

2局限性

適用無菌室（包含清潔事兒臺）浮游菌的測驗和自然環(huán)境認證。

3崗位職責

QA、QC員工閱簽。

4內容

4.1參照限度：GB/T16293-2010

4.2檢測方法

本檢測方法為記數(shù)濃度值法，即根據互聯(lián)網飄浮在空氣中的潛在性顆粒于專業(yè)的培養(yǎng)基（挑選能印證其可以適用微生物菌種生長發(fā)育的培養(yǎng)基），經多個時間和適宜的生長發(fā)育標準讓其滋長到可以看到的菌落計數(shù)，以分辨該無菌室的細菌濃度值。

4.3測試設備、防具和培養(yǎng)基

浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿（采用與儀器設備相切合的培養(yǎng)皿）、培育基、控溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器。

4.4測試狀態(tài)及檢測時間

4.4.1靜態(tài)數(shù)據和信息二種情況均可舉辦檢測，靜態(tài)數(shù)據檢測時，房間內檢測員工不可超過2人。

4.4.2在靜態(tài)數(shù)據a檢測時，單邊流無菌潔凈車間（區(qū)），檢測在空調凈化系統(tǒng)軟件正常的運轉時間不少于10分鐘后最開始；非單方面流無菌室（區(qū)），檢測在空調凈化系統(tǒng)軟件正常的運作不少于30分鐘后最開始。在靜態(tài)數(shù)據b檢測時，單邊流無菌室（區(qū)），檢測在生產加工實際操作員工撤出當場并經過10分鐘臭氧消毒后最開始；非單方面流無菌室（區(qū)），檢測在生產加工實際操作員工撤出當場并經過20分鐘臭氧消毒后最開始。

4.5取樣點真是定

4.5.1至少取樣點數(shù)量見表1，每一次最少取樣量見表2。

表1至少取樣點數(shù)量

注：針對A級單邊流無菌室（區(qū)），包含A級清潔事兒臺，總面積指的是正壓送風口外總面積；針對D級以上的非單方面流無菌室（區(qū)），總面積指的是屋子總面積。

表2最少取樣量

4.5.2取樣點部位布署宜爭取均值，阻攔取樣點在部分地區(qū)過度希罕，取樣點依據《潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控治理規(guī)程》配件×××生產車間潔凈度檢測取樣點框架圖的規(guī)定布署，每一個取樣點一樣平時取樣一次。

4.5.3事兒區(qū)取樣點部位距地0.8m~1.5m上下（稍高于事人情世故），正壓送風口測量點部位擺脫排風面30cm上下，可在重要武器裝備或重要事兒流動性局限性處增加測量點。

4.6無塵車間檢測提前準備

4.6.1采樣器在進到被測地區(qū)前先清潔外邊，隨后用75%醫(yī)用酒精消毒一遍或儲存于被測地區(qū)內，與被檢測地區(qū)一起消毒殺菌（用以A級無菌室的采樣器務必事先放到被測屋子里）。

4.6.2A/B級區(qū)接受一次性培養(yǎng)皿，其他地區(qū)按無菌技術規(guī)定，在質環(huán)室清潔事兒臺子上提早制取培養(yǎng)預留（將殺菌后的培養(yǎng)基用沙浴消溶，制冷至約50-60℃，Φ90mm培養(yǎng)皿每一個竭盡約20ml培養(yǎng)基，Φ150mm培每一個竭盡約30ml培養(yǎng)基），培育皿加蓋后在室內溫度下發(fā)至凝結。自做好的培養(yǎng)皿在無菌室內儲放不超越48鐘頭，2~8℃保存的培養(yǎng)皿一樣平時不超越1周，一次性培養(yǎng)皿在標明的有效期限內應用，落伍不可應用。

4.6.3A/B級區(qū)采用的培養(yǎng)皿在地區(qū)消毒殺菌前一次性傳到，隨自然環(huán)境一起消毒殺菌，在消毒劑拿取間鐵架子上儲存，在有效期限內應用。如要姑且傳到，則務必在前一天臭氧殺菌前根據C級與B級傳達窗傳到B級區(qū)舉辦臭氧殺菌，第二天應用。傳到前外邊也務必用75%酒精擦拭。其他地區(qū)用培養(yǎng)皿按物件傳到規(guī)定當日傳到應用。

4.6.4取樣前，首先用75%乙醇清洗采樣器的機蓋、輪盤及其外罩的內外邊（FKC型蜉蝣氣體塵菌采樣器用乙醇清洗取樣頭）。

4.6.5檢測詳盡實際操作見“JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器限度操作流程或FKC-1型蜉蝣氣體塵菌采樣器限度操作流程”。

4.6.6取樣竣事后，蓋緊培養(yǎng)皿外蓋，在培養(yǎng)皿上標明全部信息內容（包含物質生產批號，置放部位等），將培養(yǎng)皿用適宜的方法綁扎，倒放置30~35℃控溫培養(yǎng)箱中培育，培養(yǎng)時間不少于2天。

4.6.7培養(yǎng)竣事后逐一查驗培養(yǎng)皿，用眼睛對培養(yǎng)皿上任何的菌體立即記數(shù)、標記，隨后用5~10倍高倍放大鏡查驗，有無忽略。若培養(yǎng)皿上面有2個或2個以上的菌體重合，可辨別時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。

4.7檢測記錄應包含以下幾點

4.7.1被檢測地區(qū)名字、檢測日期、測試根據、被試者名字、測試設備及檢測方法的外貌，檢測時需接受的情況和房間內檢測員工數(shù)，取樣點數(shù)量，檢測頻次、取樣總流量，檢測實際效果（包含全部統(tǒng)計分析籌算材料）等。

4.7.2若為動態(tài)性檢測，還應記錄當場實際操作員工數(shù)量，當場武器裝備運行情況等。

4.8實際效果籌算

4.8.1用記數(shù)方法得到每個培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。

4.8.2每一個測量點的浮游菌均值濃度值籌算按住式舉辦

4.9實際效果鑒定

4.9.1每一個測量點的浮游菌均值濃度值務必小于所選中鑒定限度中的界限。

4.9.2在靜態(tài)數(shù)據檢測時，若某測量點的浮游菌均值菌濃度值超越鑒定限度，則應再次取樣2次，兩次檢測實際效果均及格才氣判為相符合。

4.9.3若有超越劃分者，務必即時與生產制造單位聯(lián)絡，對該地區(qū)舉辦消毒殺菌或其他處理，隨后再次檢測至及格。

4.10一樣平時監(jiān)管

4.10.1浮游菌一樣平時監(jiān)管設糾偏裝置程度和警示程度（限度局限性及抽樣次數(shù)見《潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控治理規(guī)程》），以確保無菌室（區(qū)）的細菌濃度值遭受操縱，按時檢驗以查驗微生物菌種負載及其消毒液的法律效力，并且做好趨向分析。靜態(tài)數(shù)據和信息的監(jiān)管都能夠接受該方法。

4.10.2針對浮游菌的抽樣次數(shù)，若是涌起以下情況應考慮改動，在評定下列情況后，也應明確別的項目的檢驗次數(shù)

――持續(xù)超越糾偏裝置程度和警示程度；

――歇工時間比預估拓寬；

――重要地區(qū)內發(fā)覺有環(huán)境污染存有；

――在生產制造時期，空氣凈化設備舉辦一切重要的檢修；

――一樣平時實際操作記錄體現(xiàn)出共性的數(shù)據信息；

――消毒殺菌技術規(guī)范的更改；

――造成生物入侵的安全事故等；

――當生產制造武器裝備有重要檢修或增加武器裝備時；

――當無菌室（區(qū)）構造或地區(qū)漫衍有重要變更時。

4.11重視事宜

4.11.1JYQ-Ⅱ型浮游菌采樣器經消毒殺菌后先不放進培養(yǎng)皿，打開浮游菌采樣器，使儀器設備中的殘留消毒液揮發(fā)，時間不少于5分鐘，查驗總流量并憑據取樣量調節(jié)設置取樣時間。

4.11.2單邊流無菌室（區(qū)）或正壓送風口，采樣器取樣口房屋朝向應正對著氣旋偏重，非單方面流無菌室（區(qū)），取樣口往上。

4.11.3檢測時需要穿著與被測地區(qū)潔凈度等級規(guī)定相切合并經高壓滅菌后的潔凈服。

4.11.4布署取樣點時，最少應只要繞開細顆粒物較密集的回風管道。

4.11.5取樣竣事，要用75%酒精噴射采樣器外罩的內部和輪盤（FKC型蜉蝣氣體塵菌采樣器噴出取樣頭和愛惜蓋）。

4.11.6應接受一切對策避免取樣過程的環(huán)境污染和其它很有可能對樣版的環(huán)境污染。

4.11.7每次培養(yǎng)基應該有對比實驗，磨煉培養(yǎng)基自身是不是環(huán)境污染，可每次選中3只培養(yǎng)皿做為對比培養(yǎng)；培育皿在用以檢驗時，為阻攔培養(yǎng)皿運送或挪動過程導致的危害，宜與此同時舉辦對比實驗，每一次或各個地區(qū)取1個對比皿，與取樣皿同法實際操作但不需外露取樣，隨后與采集后的培養(yǎng)皿一起放進培養(yǎng)箱中培育，實際效果應無菌檢測落生長發(fā)育。

4.11.8取樣前要認真仔細每一個培養(yǎng)皿的品質，如發(fā)覺質變、損壞或環(huán)境污染的應去除。

4.11.9因為病菌品種繁多，差別甚大，記數(shù)時一樣平時用電子散射光于培養(yǎng)皿后面或正臉細心調查，不必漏計培養(yǎng)皿邊沿生長發(fā)育的菌體，并須重視細菌菌落或培養(yǎng)基沉淀的差別，必須時要高倍顯微鏡辨別。

4.11.10務必按時對控溫培養(yǎng)箱舉辦校檢。